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一 實驗目的

1 掌握觀察霉菌形態(tài)的基本方法，并觀察其形態(tài)特征
2 掌握觀察放線菌形態(tài)的基本方法，并觀察放線菌的形態(tài)特征

二 實驗原理

1 霉菌的原理

霉菌菌絲較粗大，細胞易收縮變形，而且孢子很容易飛散，所以制標本時常用乳酸石炭酸棉藍染色液。此染色液制成的霉菌標本片其特點是（a）細胞不變形；(b)具有殺菌防腐作用，且不易干燥，能保持較長時間；（c）溶液本身呈藍色，有一定染色效果。霉菌的菌絲、分生孢子梗和分生孢子的形態(tài)常作為分類的重要依據(jù)。

2 放線菌原理

放線菌在固體培養(yǎng)基上呈輻射狀生長而得名。放線菌是由不同長短的纖細的菌絲所形成的單細胞菌絲體。菌絲體分為兩部分，即潛入培養(yǎng)基中的營養(yǎng)菌絲（或稱基內(nèi)菌絲）和生長在培養(yǎng)基表面的氣生菌絲。有些氣生菌絲分化成各種孢子絲，呈螺旋形、波浪形或分枝狀等。孢子常呈圓形、橢圓形或桿形。氣生菌絲及孢子的形狀和顏色常作為分類的重要依據(jù)。

三 實驗器材

1 菌種：在生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)48-72h的曲霉（Aspergillus sp.），青霉 (Penicillium sp.)，根霉(Rhizopus sp.), 培養(yǎng)72-120h的5406放線菌(細黃鏈霉菌).
2 染色液和試劑：乳酸石炭酸棉藍染色液,生理鹽水,石炭酸復紅染液，呂氏堿性美藍染液. 3 器材：土豆培養(yǎng)基平板或查氏培養(yǎng)基平板，高氏1號培養(yǎng)基平板, 接種環(huán)，載玻片，蓋玻片，鑷子，酒精燈等

四 實驗方法

(一) 霉菌觀察:
1 直接觀察: 將培養(yǎng)3—4天的霉菌培養(yǎng)皿打開，放在顯微鏡低倍鏡下尋找菌落的邊緣，直接觀察菌絲，分生孢子梗和分生孢子。 2 染色觀察: 于潔凈載玻片上，滴一滴乳酸石炭酸棉藍染色液，用鑷子從霉菌菌落的邊緣外取少量帶有孢子的菌絲置染色液中，再細心地將菌絲挑散開，然后小心地蓋上蓋玻片，注意不要產(chǎn)生氣泡。置顯微鏡下先用低倍鏡觀察，必要時再換高倍鏡。

(二) 放線菌觀察:

1．放線菌自然生長狀態(tài)的觀察

將在生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)3—4天的放線菌培養(yǎng)皿打開，放在顯微鏡低倍鏡下尋找菌落的邊緣，直接觀察菌絲，孢子絲和孢子。 2.染色觀察

（1）用接種鏟或鑷子連同培養(yǎng)基挑取放線菌菌苔置載玻片*。

（2）用另一載玻片將其壓碎，棄去培養(yǎng)基，制成涂片，干燥、固定。

（3）用呂氏堿性美藍染液或石炭酸復紅染液染0.5—1分鐘，水洗。

（4）干燥后，用油鏡觀察營養(yǎng)菌絲,孢子絲及孢子的形態(tài)。