細(xì)胞的培養(yǎng)為什么需要二氧化碳培養(yǎng)箱？一般細(xì)胞培養(yǎng)液的pH在7.0-7.4之間，由于碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)是人體血液中重要的pH緩沖系統(tǒng)，所以大多數(shù)培養(yǎng)液用它來(lái)保持穩(wěn)定的pH。用粉末配制培養(yǎng)液時(shí)，常常需要加入一定量的碳酸氫鈉。對(duì)大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)液而言，為了維持穩(wěn)定的pH，培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在4-12%之間，以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度。同時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣，以便于氣體的交換。
那么采用其他pH緩沖系統(tǒng)是不是就不需要二氧化碳培養(yǎng)箱了呢？人們發(fā)現(xiàn)由于空氣中的二氧化碳濃度很低，如果細(xì)胞不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的碳酸氫根會(huì)被耗盡，這樣會(huì)影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。所以大部分動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)，都是需要二氧化碳培養(yǎng)箱的。
在過(guò)去數(shù)十年間，分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、藥理學(xué)等的研究領(lǐng)域都有了驚人的發(fā)展和進(jìn)步，同時(shí)，這些領(lǐng)域中的技術(shù)應(yīng)用也不得不跟上“腳步"。雖然典型的生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有了很大的改變，但二氧化碳培養(yǎng)箱依舊是實(shí)驗(yàn)室中的主要組成部分，其使用的目的都是維持和促使細(xì)胞組織更好地生長(zhǎng)。然而，隨著技術(shù)的進(jìn)步，其功能和運(yùn)作都變得越來(lái)越精確、可靠和方便。如今，二氧化碳培養(yǎng)箱已成為實(shí)驗(yàn)室普遍使用的常規(guī)儀器之一，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)、微生物、農(nóng)業(yè)科學(xué)、藥物學(xué)的研究和生產(chǎn)。
CO2培養(yǎng)箱是通過(guò)對(duì)周圍環(huán)境條件的控制制造出一個(gè)能使細(xì)胞/組織更好地生長(zhǎng)的環(huán)境，條件控制的結(jié)果就會(huì)形成一個(gè)穩(wěn)定的條件：如恒定的酸堿度(pH值：8.6-8.8)、穩(wěn)定的溫度(39°C)、較高的相對(duì)濕度(90%)、穩(wěn)定的CO2水平(8%)，這就是為什么諸多領(lǐng)域的研究員如此熱衷于使用方便穩(wěn)定可靠的二氧化碳培養(yǎng)箱。
此外，由于增加了二氧化碳濃度控制，并且使用微控制器對(duì)培養(yǎng)箱溫度進(jìn)行精確控制，使生物細(xì)胞，組織等的培養(yǎng)成功率、效率都得到改善?？傊?，二氧化碳培養(yǎng)箱是普通的電熱恒溫培養(yǎng)箱不可替代的新型培養(yǎng)箱。
使用者對(duì)二氧化碳培養(yǎng)箱的選購(gòu)關(guān)心的當(dāng)然就是其可靠性、污染物的控制和使用方便。CO2培養(yǎng)箱主要控制模擬活體內(nèi)環(huán)境相關(guān)的3個(gè)基本變量：穩(wěn)定的CO2水平、溫度、相對(duì)濕度。要有穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境，就要考慮這三方面的影響因素，選購(gòu)時(shí)，就應(yīng)該對(duì)這些“重中之重"有一定的了解才能選到適合自己的儀器。但是，其它的一些方面的“小"因素也不能忽略，因?yàn)檫@些都會(huì)影響儀器的使用價(jià)值和壽命。選購(gòu)時(shí)，就應(yīng)該從各方面的因素加以考慮。
溫度控制：
保持培養(yǎng)箱內(nèi)恒定的溫度是維持細(xì)胞健康生長(zhǎng)的重要因素。當(dāng)選購(gòu)二氧化碳培養(yǎng)箱時(shí)，有兩種類型的加熱結(jié)構(gòu)可供選擇：氣套式加熱和水套式加熱。雖然這兩種加熱系統(tǒng)都是精確和可靠的，但是它們都有著各自的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。水套式培養(yǎng)箱是通過(guò)一個(gè)獨(dú)立的熱水間隔間包圍內(nèi)部的箱體來(lái)維持溫度恒定的。熱水通過(guò)自然對(duì)流在箱體內(nèi)循環(huán)流動(dòng)，熱量通過(guò)輻射傳遞到箱體內(nèi)部從而保持了溫度的恒定。*的水套式設(shè)計(jì)有其優(yōu)點(diǎn)：水是一種很好的絕熱物質(zhì)，當(dāng)遇到斷電的時(shí)候，水套式系統(tǒng)就能更可靠地長(zhǎng)久保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性(維持溫度恒定的時(shí)間是氣套式系統(tǒng)的4-5倍)。如果您的實(shí)驗(yàn)環(huán)境不太穩(wěn)定(如有用電限制，或者經(jīng)常停電)并需要保持長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定的培養(yǎng)條件，此時(shí)，水套式設(shè)計(jì)的二氧化碳培養(yǎng)箱就是您較好的選擇。而氣套式加熱系統(tǒng)是通過(guò)箱體內(nèi)的加熱器直接對(duì)箱內(nèi)氣體進(jìn)行加熱的。氣套式設(shè)計(jì)在箱門頻繁開(kāi)關(guān)引起的溫度經(jīng)常性改變的情況下能夠迅速恢復(fù)箱體內(nèi)的溫度穩(wěn)定。因此，氣套式與水套式相比，具有加熱快，溫度的恢復(fù)比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點(diǎn)，特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開(kāi)關(guān)的培養(yǎng)。
此外，有些類型的二氧化碳培養(yǎng)箱還具備外門及輔助加熱系統(tǒng)，這個(gè)系統(tǒng)能加熱內(nèi)門，提供給細(xì)胞良好的濕度環(huán)境，保證細(xì)胞滲透壓維持平衡，且可有效防止形成冷凝水以保持培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度和溫度。如果您的培養(yǎng)環(huán)境需要精確的控制，那么這個(gè)輔助系統(tǒng)則是*的。
CO2控制：
CO2濃度探測(cè)可通過(guò)兩種控制系統(tǒng)——紅外傳感器(IR)或熱傳導(dǎo)傳感器(TC)進(jìn)行測(cè)量。當(dāng)二氧化碳培養(yǎng)箱的門被打開(kāi)時(shí)，CO2從箱體內(nèi)漏出，此時(shí)傳感器就會(huì)探測(cè)到CO2濃度的降低，并做出及時(shí)的反應(yīng)，重新注入CO2使其恢復(fù)到原先預(yù)設(shè)的水平。熱傳導(dǎo)傳感器監(jiān)控CO2濃度的工作原理是通過(guò)測(cè)量?jī)蓚€(gè)電熱調(diào)節(jié)器之間的電阻變化來(lái)實(shí)現(xiàn)的。箱內(nèi)CO2濃度的變化會(huì)改變兩個(gè)電熱調(diào)節(jié)器間的電阻，從而促使傳感器產(chǎn)生反應(yīng)以達(dá)到調(diào)節(jié)CO2水平的作用。TC控制系統(tǒng)的一個(gè)缺點(diǎn)就是箱內(nèi)溫度和相對(duì)濕度的改變會(huì)影響傳感器的精確度。當(dāng)箱門被頻繁打開(kāi)時(shí)，不僅CO2濃度，溫度和相對(duì)濕度也會(huì)發(fā)生很大的波動(dòng)，因而影響了TC傳感器的精度。當(dāng)需要精確的培養(yǎng)條件和頻繁開(kāi)啟培養(yǎng)箱門時(shí)，此控制系統(tǒng)就顯得不太適用了。紅外傳感器作為另一個(gè)可選擇的控制系統(tǒng)比TC系統(tǒng)具備更精確的CO2控制能力，它是通過(guò)一個(gè)光學(xué)傳感器來(lái)檢測(cè)CO2水平的。IR系統(tǒng)包括一個(gè)紅外發(fā)射器和一個(gè)傳感器，當(dāng)箱體內(nèi)的CO2吸收了發(fā)射器發(fā)射的部分紅外線之后，傳感器就可以檢測(cè)出紅外線的減少量，而被吸收紅外線的量正好對(duì)應(yīng)于箱體內(nèi)CO2的水平，從而可以得出箱體內(nèi)CO2的濃度。因?yàn)镮R系統(tǒng)不會(huì)因溫度和相對(duì)濕度的改變而受到影響，所以它比TC系統(tǒng)更精確，特別適用于需要頻繁開(kāi)啟培養(yǎng)箱門的細(xì)胞培養(yǎng)。
相對(duì)濕度控制：
培養(yǎng)箱內(nèi)相對(duì)濕度的控制是非常重要的，維持足夠的濕度水平才能保證不會(huì)由于過(guò)度干燥而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。大型的二氧化碳培養(yǎng)箱是用蒸汽發(fā)生器或噴霧器來(lái)控制相對(duì)濕度水平的，而大多數(shù)中、小型培養(yǎng)箱則是通過(guò)濕度控制面板的蒸發(fā)作用產(chǎn)生濕氣的(其產(chǎn)生的相對(duì)濕度水平可達(dá)95-98%)。一些培養(yǎng)箱有一個(gè)能在加熱的控制面板上保持水份的濕度蓄水池，這樣可以增強(qiáng)蒸發(fā)作用，此蓄水池能增加相對(duì)濕度水平達(dá)97-98%。但是，這個(gè)系統(tǒng)也更復(fù)雜，由于復(fù)雜結(jié)構(gòu)的增加一些難以預(yù)料的問(wèn)題也會(huì)在使用過(guò)程中出現(xiàn)。
微處理控制系統(tǒng)：
每一個(gè)使用者都希望所用的儀器能夠方便好用，微處理控制系統(tǒng)和其它各種功能附件(如高溫自動(dòng)調(diào)節(jié)和警報(bào)裝置、CO2警報(bào)裝置、密碼保護(hù)設(shè)置、自動(dòng)校準(zhǔn)系統(tǒng)等等)的運(yùn)用，就使得二氧化碳培養(yǎng)箱的操作和控制都非常的簡(jiǎn)便。微處理控制系統(tǒng)是維持培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度和CO2濃度穩(wěn)態(tài)的操作系統(tǒng)。例如PIC微處理器控制系統(tǒng)，它能嚴(yán)格控制氣體的濃度并將其損耗降*低水平，以保證培養(yǎng)環(huán)境恒定不變，且能保證長(zhǎng)期培養(yǎng)過(guò)程中箱內(nèi)溫度精確，并有LED顯示，可設(shè)置、校正溫度和CO2濃度。不同的微處理系統(tǒng)雖然名字不相同，但是其原理與控制效果則無(wú)甚區(qū)別，選購(gòu)時(shí)不必太在意它們名字上的區(qū)別，關(guān)鍵是要自己覺(jué)得使用起來(lái)方便，容易操作，而且要能夠達(dá)到所需的控制精度。
此外，我想一個(gè)報(bào)警系統(tǒng)也是不可少的吧，它能讓你及時(shí)知道培養(yǎng)箱出現(xiàn)的情況，并做出反應(yīng)，從而很大限度地降低了損失，保證實(shí)驗(yàn)的連續(xù)性。有些培養(yǎng)箱有聲/光報(bào)警裝置，溫度變化達(dá)±0.5℃，或CO2濃度變化達(dá)±5時(shí)，即會(huì)自動(dòng)報(bào)警；有些具有CO2濃度異常報(bào)警顯示功能。這些裝置都是為了方便使用者，以減少繁瑣枯燥的實(shí)驗(yàn)過(guò)程而設(shè)計(jì)的。
二氧化碳培養(yǎng)箱的使用注意事項(xiàng)：
1. 儀器應(yīng)放置在平整的地面上，環(huán)境應(yīng)清潔整齊，干燥通風(fēng)；
2. 儀器使用前，各控制開(kāi)關(guān)均應(yīng)處于非工作狀態(tài)；
3. 不可將流入氣體壓力調(diào)至過(guò)大，以免沖破管道及損傷探測(cè)器；
4. 關(guān)好培養(yǎng)箱的門，以免氣體外泄，影響試驗(yàn)效果；
5. 每次停機(jī)前，各控制開(kāi)關(guān)均應(yīng)處于非工作狀態(tài)才切斷電源；
6. 鋼瓶氣體需純凈達(dá)標(biāo)，以免損傷儀器；
7. 保持培養(yǎng)箱內(nèi)空氣干凈，并定期消毒；
8. 經(jīng)常注意箱內(nèi)蒸餾水槽中蒸餾水的量，以保持箱內(nèi)相對(duì)濕度，同時(shí)避免培養(yǎng)液蒸發(fā)；
9. 不適用于含有易揮發(fā)性化學(xué)溶劑，低濃度爆炸氣體和低著火點(diǎn)氣體的物品以及有毒物品的培養(yǎng)。
10. 正確地使用和注意儀器的保養(yǎng)，使其處于良好的工作狀態(tài)，可延長(zhǎng)儀器的使用壽命；
11. 制冷系統(tǒng)停止工作后，用軟布擦凈工作腔和玻璃觀察窗；
12.儀器在連續(xù)工作期間，每三個(gè)月應(yīng)做一次定期檢查；檢查是否有水滴，污物等落入電機(jī)和外露的制冷元件上；清理壓縮機(jī)，冷凝器上的灰塵和污物；檢查保險(xiǎn)絲，控制元件及緊固螺釘；
13. 儀器經(jīng)長(zhǎng)期使用，自然磨損屬正?，F(xiàn)象，應(yīng)聯(lián)系廠家進(jìn)行維修。
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