名稱:Gey's紅細(xì)胞裂解液(Gey's Lysis Buffer)
產(chǎn)品規(guī)格:500ml/100ml
分類:細(xì)胞組分分離
儲存條件:4℃,12個月
用途: 溶紅細(xì)胞,紅細(xì)胞裂解液
注意事項(xiàng): 無菌溶液。主要由氯化銨、葡萄糖、氯化鎂、*等組成。注意無菌操作,經(jīng)過濾除菌處理。
使用范圍:科研使用,不能應(yīng)用于臨床
產(chǎn)品簡介:
在生物科研領(lǐng)域,經(jīng)常需要去除紅細(xì)胞。去除紅細(xì)胞的方法有多種,如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。Gey's Lysis Buffer是一種從人、鼠或其他哺乳動物等體內(nèi)的組織樣品或血液中裂解并去除無核紅細(xì)胞的溶液,主要由磷酸鹽、葡萄糖、NH4Cl等組成。
Leagene Gey's Lysis Buffer經(jīng)過優(yōu)化配方,含碳酸鹽、Ca2+、Mg2在裂解無核紅細(xì)胞的同時幾乎不損傷淋巴細(xì)胞(Lymphocyte)或其它有細(xì)胞核的細(xì)胞。本裂解液經(jīng)高壓滅菌及過濾除菌,經(jīng)過Gey's Lysis Buffer處理過的血液或組織細(xì)胞樣品可以用于后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測,尤其適用于去除皮細(xì)胞脾細(xì)胞中的紅細(xì)胞.
自備材料:
1、 * 2、 胎牛血清(FCS) 3、 低溫離心機(jī) 4、 Hanks*(HBSS)
操作步驟:
(一)組織細(xì)胞樣本
1、制備細(xì)胞懸液: 新鮮組織經(jīng)過*或膠原酶等消化處理, 通過適當(dāng)方法制備成細(xì)胞懸液,離心棄上清。
2、裂解: 加入Gey's Lysis Buffer,輕柔吹打混勻,立即冰浴裂解
3、加入FCS,離心,棄紅色上清。如無低溫離心機(jī),本步驟亦可在室溫下操作。
4、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不*,可以重復(fù)上述步驟2和步驟3各一次。
5、洗滌:根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求加入適量HBSS,輕柔混勻重懸沉淀。離心,棄上清,該離心步驟亦可在室溫下操作,所加入HBSS的量一般應(yīng)大于細(xì)胞沉淀體積的5倍以上。
6、如有必要,重復(fù)上述步驟5一次,共洗滌1~2次。
7、根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀,進(jìn)行計(jì)數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。