影響到培養(yǎng)基質(zhì)量的因素有很多,出去保存、運輸、溫度等問題中,污染參數(shù)也是一個決定質(zhì)量的重要因素。每一批在使用之前必須仔細檢查污染情況。
上海古朵生物建議:
將一批制備的在室溫放3天以檢查污染情況。或者從一批測試中拿出兩個放在孵箱內(nèi)37°C孵育24小時。經(jīng)必要的孵育后,檢查有無生長。假如有生長,從同一批制備中再拿出兩個,重復上述過程一次。假如再次出現(xiàn)污染,表明制備的這一批有污染。建議當一批污染超過10%應棄往。
生產(chǎn)率(PR)您了解過嗎?
PR=測試板上的克隆數(shù)×稀釋倍數(shù)
質(zhì)控板上的克隆數(shù)×稀釋倍數(shù)
這種方法是對Miles和Misra技術的改進。將測試用的培養(yǎng)物過夜培養(yǎng),用緩沖蛋白胨水做10倍倍比稀釋。將測試板分成4等份,并且每一部分標記好所用培養(yǎng)物的稀釋倍數(shù)。
從高濃度開始,將相應稀釋倍數(shù)的培養(yǎng)物放在相應的1/4圓內(nèi)。并對質(zhì)控板做同樣的操縱。將每滴培養(yǎng)物在相應的1/4圓內(nèi)涂布,并在37°C培養(yǎng)18小時。計數(shù)測試和質(zhì)控板zui低稀釋倍數(shù)的克隆數(shù)。
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