高首鱘虹彩病毒PCR檢測試劑盒反應(yīng)液的配制
PCR反應(yīng)體系的配置方式有時也會影響反應(yīng)的正常進行。常規(guī)方法與其它酶學(xué)反應(yīng)一樣，在后加入DNA聚合酶。早期的PCR儀沒有帶加熱的蓋子，要求在反應(yīng)液上覆蓋一層礦物油，防止水分蒸發(fā)。
對于使用具3’-5’外切活性的高溫DNA聚合酶時，有時會擴增不出產(chǎn)物。在遇到這個問題時，如果將反應(yīng)成分分開配制，A管含模板、引物和dNTP，以及調(diào)整體積的H2O，B管含緩沖液、DNA聚合酶和水，然后再將兩管溶液混合起來，可較好地克服這個問題。
按照常規(guī)的方法配制反應(yīng)體系，有時會出現(xiàn)非特異性擴增的問題。熱啟動(hotstart)PCR操作方式可較好解決這一問題。將dNTP、緩沖液，Mg2+和primer先配制好，然后加入一粒蠟珠(如AmpliWaxPCRQam100)，加熱熔化，再冷卻，使蠟將溶液封住，后加入模板和DNA聚合酶等剩余成分。只有當(dāng)PCR反應(yīng)進入高溫階段后，蠟層熔化，所有反應(yīng)成分才會混合在一起。
已開封或者使用后，剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存，ELISA檢測試劑盒開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。
根據(jù)我司規(guī)定未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意，收到試劑盒后請盡快將標準品、檢測溶液A、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃。
