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蛋白質(zhì)測(cè)定儀是如何對(duì)食品中的蛋白質(zhì)含量進(jìn)行測(cè)定的?

時(shí)間:2023/6/1閱讀:304
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蛋白質(zhì)測(cè)定儀是一種用于測(cè)定食品中蛋白質(zhì)含量的儀器,常用的方法之一是利用巴氏定量法(Bicinchoninic Acid,BCA)或低里氏定量法(Lowry Method)。以下是蛋白質(zhì)測(cè)定儀(以BCA法為例)對(duì)食品中蛋白質(zhì)含量進(jìn)行測(cè)定的基本步驟:

1. 樣品制備:將食品樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚?,如研磨、溶解或提取,以獲得均勻的樣品溶液。根據(jù)樣品的特性和所采用的方法,可能需要進(jìn)行額外的預(yù)處理步驟,如去除脂肪、除去干擾物等。

2. 準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)曲線:準(zhǔn)備一系列已知濃度的蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液。這些標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度應(yīng)覆蓋待測(cè)樣品中蛋白質(zhì)含量的范圍。一般情況下,使用已知濃度的蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液來(lái)構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線,該曲線將濃度與吸光度或顏色反應(yīng)強(qiáng)度關(guān)聯(lián)起來(lái)。

3. 反應(yīng)體系配置:將待測(cè)樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液分別與BCA試劑混合,在一定的條件下進(jìn)行反應(yīng)。BCA試劑與蛋白質(zhì)中的蛋白質(zhì)骨架中的氨基酸產(chǎn)生反應(yīng),形成著色的復(fù)合物。

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4. 反應(yīng)和孵育:將混合物在適當(dāng)?shù)臏囟认路跤欢螘r(shí)間,使試劑與樣品中的蛋白質(zhì)充分反應(yīng)。

5. 吸光度測(cè)量:使用蛋白質(zhì)測(cè)定儀測(cè)量各個(gè)樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度或顏色反應(yīng)強(qiáng)度。一般情況下,將樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較,根據(jù)吸光度或顏色反應(yīng)強(qiáng)度的測(cè)量值確定樣品中蛋白質(zhì)的濃度。

6. 計(jì)算結(jié)果:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和吸光度或顏色反應(yīng)強(qiáng)度的測(cè)量結(jié)果,計(jì)算出樣品中蛋白質(zhì)的含量。這通常涉及對(duì)測(cè)量值進(jìn)行插值或外推,以確定樣品中蛋白質(zhì)的濃度。

需要注意的是,具體的操作步驟可能會(huì)因使用的蛋白質(zhì)測(cè)定方法和儀器的型號(hào)而有所不同。因此,在使用蛋白質(zhì)測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照儀器的操作說(shuō)明和所采用的方法進(jìn)行操作,并參考相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范進(jìn)行樣品制備和數(shù)據(jù)處理,以確保測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。


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