色譜柱常見問題解答
溶解性不好的樣品
如果樣品不溶于流動(dòng)相中的有機(jī)溶劑怎么辦，按照化學(xué)合成人員的溶解性測試，的確有些樣品不能*溶解在甲醇或者乙腈中，可是對于分析測試用的樣品濃度來說，樣品不太可能不溶于相同的溶劑中。如果樣品在分析用濃度水平不能溶解的話，它怎么能在分析過程中從色譜柱上被洗脫出來呢？對于極少數(shù)情況，樣品在水-有機(jī)溶劑中的臨界濃度對其溶解性很重要。但是對于好的液相色譜系統(tǒng)，比較傾向樣品溶解在流動(dòng)相中，并會(huì)被流動(dòng)相洗脫出來。大多數(shù)色譜柱的清洗方法關(guān)注的不是樣品如何從色譜柱洗脫下來，而是如何將樣品所帶來的污染物從色譜柱上清洗掉，那么采用強(qiáng)溶劑將是選擇。
可以采取強(qiáng)溶劑沖洗嗎
有些色譜工作者喜歡用一些洗脫能力比流動(dòng)相中強(qiáng)溶劑更強(qiáng)的溶劑來清洗色譜柱，例如，在用乙腈沖洗色譜柱后，采用二氯甲烷或甲基叔丁基醚或者DMSO沖洗。的確這樣做可以出去一些強(qiáng)吸附在色譜柱上的污染物，但有時(shí)要考慮值不值得。我們從經(jīng)濟(jì)的角度考慮一下：對于制藥行業(yè)來說，一般一個(gè)LC-UV的分析大約要花費(fèi)50美元。如果一個(gè)價(jià)值500美元的色譜柱可以持續(xù)運(yùn)行500次進(jìn)樣的話，那么每一次進(jìn)樣花費(fèi)1美元，是全部花費(fèi)的2%。如果你用1小時(shí)來清洗色譜柱，并使其壽命延長一倍的話，你也只是節(jié)約全部費(fèi)用的1%，這是一種很好的投資嗎？我覺得如果一根色譜柱可以進(jìn)樣500次的話，就已經(jīng)很值了。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，即使是血樣樣品，色譜柱常常能經(jīng)受2000次進(jìn)樣或者更多。色譜柱是消耗品，不是固定資產(chǎn)，即使它非常貴也仍然是耗材
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