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WB蛋白

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Western blotting(WB蛋白)是在蛋白質凝膠電泳和固相免疫測定基礎上發(fā)展起來的蛋白質檢測技術,是將SDS-PAGE電泳分離的蛋白質樣本轉移到固相載體(硝酸纖維素NC膜,PVDF膜)上,以固相載體上的蛋白質作為抗原,與合適的抗體結合,再與酶標記的二抗結合,經(jīng)過底物顯色或放射自顯影對蛋白質進行鑒定及定量的分析技術,其檢測蛋白質的靈敏度為ng級,該技術廣泛應用于醫(yī)學、生物學研究領域。

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WB蛋白免疫檢測:Western blotting(WB)是在蛋白質凝膠電泳和固相免疫測定基礎上發(fā)展起來的蛋白質檢測技術,是將SDS-PAGE電泳分離的蛋白質樣本轉移到固相載體(硝酸纖維素NC膜,PVDF膜)上,以固相載體上的蛋白質作為抗原,與合適的抗體結合,再與酶標記的二抗結合,經(jīng)過底物顯色或放射自顯影對蛋白質進行鑒定及定量的分析技術,其檢測蛋白質的靈敏度為ng級,該技術廣泛應用于醫(yī)學、生物學研究領域。
WB蛋白流程:
1、客戶告知實驗分組、編號、檢測樣本類型、種屬、指標及背景設計資料,有具體要求請事先說明;
2、簽訂合同,寄送樣本和抗體,如需我方提供抗體請事先說明;
3、進行實驗,提供防偽版實驗結果,待客戶確定后付清余款,提供原始膠片和實驗報告;
4、利用軟件測定目的蛋白與內參蛋白條帶的光密度值IOD,計算目的蛋白相對表達量。

客戶注意事項
1、抗體:事先咨詢上?;鶢栴D生物,明確抗體種屬以及是否有該抗體可使用,如無可由雙方協(xié)商而定,客戶自己購買提供或我公司提供;

2、標本收集與保存:
組織樣品  新鮮組織放入液氮或-70度保存,組織不少于100mg(約綠豆大?。?;
培養(yǎng)細胞  通過細胞計數(shù)取不少于2000000個細胞于EP管,加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑,混勻后保存于冰箱(-70℃,避免反復凍融);
血液細胞標本  以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑,保存(-70℃可*保存,避免反復凍融)
血清或細胞培養(yǎng)液標本  離心去掉雜質后取上清入EP管,保存(以上4℃可保存15-20天,-70℃可*保存,避免反復凍融)
3、樣本運輸:可選以下任何的一種方式寄送標本
組織樣本、細胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護劑后加冰袋運輸;
細胞樣本也可以直接快件寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染,培養(yǎng)液不漏出,細胞不要長得太滿,50%左右,灌滿培養(yǎng)液);
血清或上清液直接加冰袋寄送(密封保證液體不漏出,視路途遠近2-3天可到達)。

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