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60108-304 美國賽默飛熱電HyperSep C18 小柱

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 60108-304美國賽默飛熱電HyperSep C18 小柱

使用 SPE 樣品制備技術(shù)可極大提高多種生物學(xué)、制藥、法醫(yī)學(xué)和環(huán)境應(yīng)用的穩(wěn)健性和可靠性。Thermo Scientific  HyperSep  C18 小柱的特點是擁有用于非極性至中度極性化合物的高保留率的烷基鍵合相。 該疏水反相填料可保留大多數(shù)非極性化合物和水性基質(zhì)中的大多數(shù)有機分析物。

 60108-304美國賽默飛熱電HyperSep C18 小柱

.測定多肽,一般采用什么柱子?流動相是乙腈和水,還有微量的TFA。特別是像類似三肽的短肽,應(yīng)該怎么選擇柱子?

答:分子量不高的多肽一般選用常規(guī)C18柱就能測定,也有用離子交換柱、水性C18柱和Hilic親水作用柱的。

 

5.氨基柱在進(jìn)酸性樣品時,很傷柱子,如使用一段時間后,柱效降低,峰形改變,如何恢復(fù)?

答:氨基柱測酸性樣品,應(yīng)該是用氨基柱的HILIC模式。酸的存在可能會使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化,導(dǎo)致使用一段時間后對于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。建議:用5~10倍的柱體積的含0.5~1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱(沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動相洗去多余氨),之后,再進(jìn)行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如,0.1%。

 

6.色譜柱的技術(shù)都有哪些?比如,封尾等,這些技術(shù)在應(yīng)用時都體現(xiàn)在哪里?

答:色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù),填料技術(shù)自不待言,填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床,更多是一門藝術(shù),需要經(jīng)驗積累。

國內(nèi)和國外想比,我認(rèn)為色譜柱的差距在于:國內(nèi)公司以前都不會自己開發(fā)填料,一般買國外現(xiàn)成填料裝柱,買到的填料質(zhì)量控制權(quán)不在自己手里。另外因為裝柱歷史短,經(jīng)驗積累少,裝柱工藝也沒有*達(dá)到國外水平。另外,對色譜柱性能很關(guān)鍵的基礎(chǔ)材料——裸硅膠,國產(chǎn)的還不過關(guān),在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國外產(chǎn)品相比,差距很大。

 

7.色譜柱技術(shù)的差距在哪里?

答:色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù),填料技術(shù)自不待言,填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床,更多是一門藝術(shù),需要經(jīng)驗積累。

國內(nèi)和國外想比,我認(rèn)為色譜柱的差距在于:國內(nèi)公司以前都不會自己開發(fā)填料,一般買國外現(xiàn)成填料裝柱,買到的填料質(zhì)量控制權(quán)不在自己手里。另外,因為,裝柱歷史短,經(jīng)驗積累少,裝柱工藝也沒有*達(dá)到國外水平。另外,對色譜柱性能很關(guān)鍵的基礎(chǔ)材料——裸硅膠,國產(chǎn)的還不過關(guān),在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國外產(chǎn)品相比,差距很大。

 

8.柱子在什么情況下可以清洗一下篩板呢?原來也討論過這個問題,我也拆下來清洗過,但我看到柱前段的污染更甚,于是就用刀片刮了刮,然后把清洗好的篩板安裝上去。問題解決了,但使用壽命會不會減少呢?

答:柱頭污染了,就取出污染的,再裝一些填料。因為,加入你刮了些填料,那么微觀的塔板數(shù)就少了。假入你刮得不多,僅表面,可能就是一些臟物,所以,問題解決,但是,今后還會有同樣問題,再掛,那么不小心刮,影響柱效。建議還是裝一個預(yù)柱。

 

9.如果柱子取下來放置一段時間,需要做什么保護(hù)嗎?

答:對一般的反相柱,也就是洗干凈后放到純甲醇(乙腈)或者是80%左右的甲醇(乙腈)水中,然后用堵頭塞緊柱兩頭,以免保存溶劑揮發(fā),應(yīng)該不需要做特殊的保護(hù)。

 

10.流動相中加入適量的si氫fu喃可以改善峰形的機理是什么?

答:《高效液相色譜方法及應(yīng)用》于世林編著的上面說:甲醇為質(zhì)子給予體、乙腈為質(zhì)子接受體、si氫fu喃是偶極溶劑,應(yīng)該除了極性影響,還有另外的影響因素,至于分離機理,還是比較復(fù)雜的,不能看成是個萬能方法。

 

11.關(guān)于色譜柱的填裝問題!我個人認(rèn)為現(xiàn)在色譜柱的填裝一般有3種情況:

①國外生產(chǎn)填料并填裝完成成品賣到國內(nèi);

②國外生產(chǎn)填料,國內(nèi)填裝銷售;

③國內(nèi)生產(chǎn)填料,國內(nèi)填裝銷售。

一般情況下,第1種情況賣的貴,也質(zhì)量!可是我就不明白了:如果是填料的生產(chǎn)很復(fù)雜的話,那么填裝上國內(nèi)也跟不上去嗎?為什么換在國內(nèi)填裝就會出現(xiàn)或多或少的一些小問題呢?

答:國內(nèi)填裝會出現(xiàn)質(zhì)量小問題,和國內(nèi)目前普遍做事沒有國外嚴(yán)謹(jǐn)有關(guān)吧。如果工藝技術(shù)上沒有問題,又能制訂并切實執(zhí)行一整套嚴(yán)格的生產(chǎn)質(zhì)量管理措施,國內(nèi)填裝和國外填裝并無區(qū)別。


 

 

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