HiCynth™改良煌綠瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基,經(jīng)改良后用于選擇性分離傷*之外的沙門氏菌,樣本是糞便、食物和奶制品。
組成:
成分 g/L
HiCynth™蛋白胨5號(hào) 3.000
HiCynth™蛋白胨4號(hào) 10.000
乳糖 10.000
蔗糖 10.000
氯化鈉 5.000
酚紅 0.080
煌綠 0.0125
瓊脂 20.000
終pH值(25℃) 6.9±0.2
使用指導(dǎo):
在1000ml蒸餾水中重懸29.05g培養(yǎng)基干粉。必要時(shí)加熱以*溶解。高壓滅菌(15磅121℃,15分鐘)。避免過(guò)熱。涼至45-50℃。要提高選擇性,可無(wú)菌加入1管水化的磺胺類添加劑(#FD068),混勻后倒入無(wú)菌平板。
原理和說(shuō)明:
沙門氏菌引起多種類型的感染,從輕微的自限性胃腸炎到危及生命的傷寒。常見(jiàn)的沙門氏菌病是自限性胃腸炎,發(fā)熱持續(xù)不到2天,腹瀉持續(xù)不到7天。
HiCynth™改良煌綠瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基為分離沙門氏菌的主要培養(yǎng)基,是由Kristensen等人*描述1。考夫曼進(jìn)一步改進(jìn)2。美國(guó)公共衛(wèi)生學(xué)會(huì)3和FDA4,5也*使用煌綠瓊脂,歐洲藥典、英國(guó)藥典和印度藥典也描述了這一方法6,7,8。
該培養(yǎng)基含有煌綠,能抑制大多數(shù)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng)。傷*、志賀菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、*被廣泛抑制。臨床標(biāo)本可直接接種在該培養(yǎng)基上。但是,由于高度選擇性,*該培養(yǎng)基與其他較少抑制作用的培養(yǎng)基一起使用,以增加恢復(fù)率的機(jī)會(huì)。
該培養(yǎng)基包含有HiCynth™蛋白胨4號(hào)和HiCynth™蛋白胨5號(hào)提供必要的氮源和碳源的化合物、長(zhǎng)鏈氨基酸、維生素,還有其他必需的營(yíng)養(yǎng)成分。乳糖和葡萄糖是能量來(lái)源,它們?cè)谂囵B(yǎng)基中發(fā)酵形成酸性pH值,可被酚紅指示劑檢測(cè)到。氯化鈉維持培養(yǎng)基的滲透壓平衡。煌綠抑制可能帶來(lái)污染的微生物菌落。當(dāng)樣本懷疑有大量的競(jìng)爭(zhēng)菌時(shí),可向該培養(yǎng)基添加*(1g/L)和扁桃酸鈉(0.25g/L)。
非乳糖發(fā)酵菌在培養(yǎng)18-24小時(shí)后形成白色至粉紅色菌落。傷*和志賀菌不會(huì)在這種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。此外,變形桿菌、綠膿桿菌、枸櫞酸桿菌屬可能會(huì)模仿腸道菌產(chǎn)生紅色的小菌落。
質(zhì)量控制
外觀
淡黃色至淡粉色均一松散粉末
成膠性
結(jié)實(shí),相當(dāng)于2.0%瓊脂糖凝膠
制備好的培養(yǎng)基顏色和透明度
在平皿中為透明棕綠色至輕微乳白色凝膠
pH值(25℃)
6.70-7.10
培養(yǎng)反應(yīng)
30-35℃培養(yǎng)24-48小時(shí)?;謴?fù)率以細(xì)菌在大豆酪蛋白水解瓊脂上生長(zhǎng)為*
微生物 | 接種量(CFU) | 生長(zhǎng)狀況 | 批次值(CFU) | 恢復(fù)率 | 菌落顏色 |
傷*ATCC 14028 | 50-100 | 生長(zhǎng)旺盛 | 25-100 | ≥50% | 粉白色 |
阿博尼沙門氏菌NCTC 6017 | 50-100 | 生長(zhǎng)旺盛 | 25-100 | ≥50% | 粉白色 |
腸炎沙門氏菌ATCC13076 | 50-100 | 生長(zhǎng)旺盛 | 25-100 | ≥50% | 粉白色 |
傷*ATCC 6539 | 50-100 | 生長(zhǎng)良好 | 15-40 | 30-40% | 紅粉色 |
大腸桿菌ATCC 25922 | 50-100 | 基本不生長(zhǎng) | 0-10 | 0-10% | 黃綠色 |
大腸桿菌ATCC 8739 | 50-100 | 基本不生長(zhǎng) | 0-10 | 0-10% | 黃綠色 |
大腸桿菌 NCTC 9002 | 50-100 | 基本不生長(zhǎng) | 0-10 | 0-10% | 黃綠色 |
金黃葡萄球菌ATCC 25923 | ≥10³ | 抑制 | 0 | 0% | |
金黃葡萄球菌ATCC 6538 | ≥10³ | 抑制 | 0 | 0% | |