1.儀器介紹
Fragment Analyzer^TM全自動(dòng)毛細(xì)管電泳系統(tǒng)是基于熒光檢測(cè)技術(shù)和毛細(xì)管電泳技術(shù)發(fā)展而來(lái)的新型DNA/RNA片段分離儀器，它采用敏感的嵌入染料以及強(qiáng)大的LED光源，避免了傳統(tǒng)方法中對(duì)熒光標(biāo)記引物的依賴。
DNA/RNA片段的分離是通過(guò)對(duì)毛細(xì)管列陣?yán)锾畛涞目蓪?dǎo)電的分離膠施加高壓電場(chǎng)，依據(jù)核酸片段長(zhǎng)度不同在凝膠電泳中遷移速度不同的原理，來(lái)達(dá)到分離檢測(cè)的目的。
TILLING（Targeting Induced Local Lesions In Genomes）,即定向誘導(dǎo)基因組局部突變技術(shù)，是一種高通量、低成本且全新的反向遺傳學(xué)研究方法。TILLING技術(shù)借助高通量的檢測(cè)手段，可快速有 效從化學(xué)誘變劑處理的突變?nèi)后w中進(jìn)行點(diǎn)突變鑒定、突變體鑒定和突變表型鑒定以及SNP檢測(cè)等。傳統(tǒng)的未知突變檢測(cè)是一個(gè)挑戰(zhàn)且費(fèi)時(shí)費(fèi)力的過(guò)程。由美國(guó) AATI公司研發(fā)改進(jìn)的TILLING流程省去熒光標(biāo)記引物的使用和樣品的清洗環(huán)節(jié)，大大縮短檢測(cè)時(shí)間和人工操作步驟，使得突變檢測(cè)更加快速、更加容易。
目前，F(xiàn)ragment AnalyzerTM全自動(dòng)突變檢測(cè)系統(tǒng)已成功應(yīng)用于水稻、玉米、小麥、萵苣、西紅柿、大豆的反向遺傳學(xué)TILLING研究中。
2.Fragment Analyzer^TM系統(tǒng)Tilling分析優(yōu)勢(shì)

● 全自動(dòng) 分離膠和樣品自動(dòng)上樣，無(wú)需手動(dòng)灌膠，避免交叉污染
● 高通量 可一次檢測(cè)12或96個(gè)樣品，多為288個(gè)樣品
● 高分辨 分辨率為2bp
● 高靈敏 檢測(cè)低濃度可達(dá)5pg/ul
● 運(yùn)行快 15min內(nèi)完成700bp片段分離
● 成本低 無(wú)需芯片，毛細(xì)管可反復(fù)利用
● 易操作 PROSize2.0軟件直觀顯示分析結(jié)果
● 用途廣 可分析片段范圍為35-40000bp
● 更靈活 可提供12和96兩種型號(hào)的毛細(xì)管列陣
3.Fragment Analyzer^TM在TILLING平臺(tái)的應(yīng)用

• 點(diǎn)突變鑒定；突變體鑒定；突變表型鑒定；突變特性研究
• SNP檢測(cè)和發(fā)掘；
• 自然資源評(píng)價(jià)；
• 作物品種改良；
• 創(chuàng)造突變資源；
• 功能基因組學(xué)研究

4.與傳統(tǒng)DNA突變檢測(cè)技術(shù)相比，F(xiàn)ragment Analyzer^TM優(yōu)勢(shì)

1)不需要標(biāo)記的引物

2)省去脫鹽清除步驟
3)分析片段長(zhǎng)度可達(dá)2kbp以上，可達(dá)40k

4)可同時(shí)分析8個(gè)不同的DNA樣本組成的DNA池

5)電泳時(shí)間短
6)PRO Size™ 軟件全自動(dòng)突變檢測(cè)