陜西多樣品植物細(xì)胞組織研磨儀
.適用于各種植物組織包括根、莖、葉、花、果、種子等樣品的研磨破碎；
　　2.適用于各種動(dòng)物組織包括大腦、心臟、肺、胃、肝臟、胸腺、腎臟、腸、淋巴結(jié)、肌肉、骨骼等樣品的研磨破碎；
　　3.適用于真菌、細(xì)菌等樣品的研磨破碎；等

陜西多樣品植物細(xì)胞組織研磨儀

組織研磨機(jī)對(duì)提取小鼠尾巴RNA的實(shí)驗(yàn)步驟

實(shí)驗(yàn)步驟

1、首先將上海凈信的組織研磨機(jī)上的制冷模塊預(yù)先置于-20℃，使用時(shí)取出安裝好。將研磨珠去RNA酶處理。

2、隨機(jī)抽取小鼠的尾巴100µg，把樣本剪成盡可能小段，置于無RNA酶的2研磨單位離心管中（選擇耐液氮冷凍管子），同時(shí)加入1顆5號(hào)研磨珠和2顆3號(hào)研磨珠（如果選擇1.5研磨單位離心管，只需要加入4-5顆3號(hào)研磨珠）。

3、放置于液氮中一起浸泡3分鐘，取出放置于預(yù)冷模塊中，在全自動(dòng)樣品研磨儀上選擇13單位頻振研磨60s。（該步驟可以根據(jù)研磨的細(xì)微程度要求可以再重復(fù)一遍）

4、把研磨好的樣本加入0.06ml的PBS0.14ml的RNAiso Plus（此處選擇PBS，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要加入其他提取液，如1ml TRIzol等），繼續(xù)置于研磨機(jī)上選擇13單位頻振研磨60s。樣本將處于糊狀。（其他提取試劑有可能會(huì)出現(xiàn)泡沫，不影響實(shí)驗(yàn)）

5、取出研磨管，放入冷凍離心機(jī)中，于4度，12000g離心10分鐘

6、小心吸取上清液0.1ml至新的1.5研磨單位離心管中，蓋上管蓋，在室溫上孵育15分種，使樣品充分裂解至勻漿液較透明，如果仍有少量顆粒屬于正常情況，不影響RNA提取質(zhì)量和得率。

7、在1.5研磨單位離心管中加入0.02ml，蓋緊管蓋，振蕩混勻并將其在冰上孵育15分種，于4度，12000g離心15分鐘。離心后混合物分層：上清層，中間層，下層；RNA存在于上清層中。

8、將上清層小心轉(zhuǎn)移到一干凈的離心管中，加入等體積冰浴的異丙醇，顛倒振蕩混勻，將混合的樣品在-20度條件，孵育20分種，于4度，12000g離心10分鐘。RNA沉淀通常形成片狀沉淀附著于管壁或管底。

小心棄去上清，用1ML的冰浴75%的乙醇洗滌RNA沉淀一次，顛倒洗滌離心管管壁，并旋渦振蕩樣品，盡可能讓沉懸浮，于4度，12000g離心5分鐘，再次去除上清，晾干沉淀。

10、操作的后，在陰涼處適度干燥RNA沉淀（避免過分干燥，那樣會(huì)降底它的可溶性）。

11、用適量（一般可用0.01—0.02ml）的無RNA酶水或TE溶液來溶解RNA。抽提好的RNA，保存于-70度。

主要特征Principal Character

1、操作數(shù)量多，效果好：高效快速的工作可以在1分鐘內(nèi)完成12個(gè)樣品的研磨。省時(shí)省力，批間，批內(nèi)差異小。抽提的蛋白比活更高，核酸片斷更長。

2、無交叉污染： 樣品管在破碎過程中處于全封閉狀態(tài)，可采用一次性離心管和珠子。樣品完整保留在管內(nèi)，避免樣品間的交叉污染以及外界污染。
3、操作簡便：人性化操作界面，內(nèi)置程序控制器，可對(duì)研磨時(shí)間、轉(zhuǎn)子的振動(dòng)頻率等參數(shù)進(jìn)行設(shè)置；
4、穩(wěn)定性好：采用垂直振蕩方式，研磨更充分，穩(wěn)定性更好；
5、噪音低，小于70dB，儀器運(yùn)行過程中，不會(huì)對(duì)其它實(shí)驗(yàn)或儀器產(chǎn)生干擾。

6、方便低溫操作：當(dāng)需要低溫研磨環(huán)境，可將放有樣本的適配器浸入液氮中冷卻1-2分鐘，取出后移至主機(jī)快速固定即可開始研磨，不需要進(jìn)行再次冷凍處理，節(jié)省液氮。

7、重復(fù)性好：同一組織樣本設(shè)定相同程序，獲得相同的研磨效果。

8、工作時(shí)間短，樣本溫度不會(huì)上升。

技術(shù)參數(shù)Technical Parameter

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