GESephadexLH-20凝膠過濾填料的原理:
是由葡聚糖G-25羥丙基化加工而成,屬于分子篩凝膠,尤其適用于天然產(chǎn)物在有機(jī)溶劑中的純化。例如:類固醇、萜類、脂類以及小分子多肽等,Pharmadex LH-20同時(shí)適用于分子類別非常相似的物質(zhì)的分離和工業(yè)規(guī)模的制備,既可用于初步純化步驟,也可用于/終精制步驟,如非對映同分異構(gòu)體的分離。
制備凝膠懸浮液的過程分析:
Sephadex LH-20在使用之前必須進(jìn)行溶脹。在溶脹的過程中,要盡量避免過分?jǐn)嚢?,否則會(huì)破壞球形膠粒,且要避免使用磁力攪拌器。
1. 在室溫下,將凝膠溶脹于層析溶劑中至少三小時(shí),溶脹后膠體積的大小決定于所使用的溶劑系統(tǒng),請參考后頁之干膠溶脹表計(jì)算特定柱體積所需要干膠的量。
2. 使溶脹膠體積沉淀之后占總體積的75%,上層溶劑占25%,這時(shí),懸浮液從一個(gè)容器倒入另一容器時(shí)膠??梢苿?dòng)。
3. 將溶脹后的凝膠根據(jù)裝柱要求均勻倒入柱內(nèi),在保證膠粒不變形的前提下,應(yīng)在盡可能高的壓力下裝柱,反壓不要超過1.5ba。
GESephadexLH-20凝膠過濾填料的優(yōu)勢:
平衡
上樣前,用洗脫液平衡層析柱至少兩個(gè)柱體積直到基線變得平穩(wěn)為止,如改變?nèi)軇?yīng)該注意凝膠在新溶劑中的溶脹性質(zhì),并根據(jù)性質(zhì)確定柱高調(diào)節(jié)器的位置,如使用相同的溶劑,在以后的層析中柱平衡可以省略。
洗脫液
為確保延長層析柱的使用壽命,所有的緩沖液都應(yīng)該離心或經(jīng)過0.45um的膜過濾以除去雜質(zhì)。
樣品
樣品體積應(yīng)該占柱總體積的1-2%,同樣在使用之前樣品應(yīng)該離心或經(jīng)過0.45um的膜過濾。
洗脫
洗脫流速應(yīng)根據(jù)情況而定,/大張性流速約12cm/min(反壓1.5ba),建議流速為1-10cm/h。總體來說,較低的流速,具有較高的分辯率。
技術(shù)參數(shù):
貨號 | 產(chǎn)品 | 包裝 | 顆粒度大小(um) | 性能/應(yīng)用 | PH穩(wěn)定性工作(清洗) | 耐壓(pa) | /高流速(ch/m) |
17-0090-10 | Sephadex LH-20 | 25 g | 100-4000 | 干粉 | 脂肪酸、激素、維他命、 | 2-13 | 720 |
17-0090-01 |
| 100 g |
| 18-111 | 天然產(chǎn)物 | [2-13] |
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17-0090-02 |
| 500 g |
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17-0090-03 |
| 5 kg |
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