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分子熒光光譜儀的分析方法

   2020年01月15日 10:41  
  【儀器網(wǎng) 使用手冊分子熒光光譜儀可以進(jìn)行樣品的定性分析與定量分析。目前,熒光分析多數(shù)用于熒光物質(zhì)的定量分析。常用的定量方法有工作曲線法、直接比較法和內(nèi)標(biāo)法。
 
  分析方法
 
  (1)定性方法:
 
  不同分子結(jié)構(gòu)的各種熒光物質(zhì),具有不同的激發(fā)光譜(吸收光譜)和熒光光譜,這是分子熒光分析的定性依據(jù)。
 
  在一定實驗條件下,用熒光分光光度計作試樣和標(biāo)樣的激發(fā)光譜和熒光光譜,然后比較它們的光譜圖,即可鑒定試樣物質(zhì)。
 
  (2)定量方法:
 
  1.工作曲線法
 
  先配一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液并分別測定其熒光值,然后將減去試劑空白熒光值的標(biāo)準(zhǔn)溶液熒光值與其相應(yīng)濃度作圖,即其工作曲線。
 
  根據(jù)試液及試液空白熒光值,在此曲線上即可找到試液的濃度。同時根據(jù)工作曲線的線性情況,可確定試液的濃度范圍上限。
 
  2.直接比較法
 
  試樣和標(biāo)樣溶液的濃度比=(試樣熒光值-試樣本底熒光值)/(標(biāo)樣熒光值-標(biāo)樣本底熒光值)
 
  直接比較法簡單快速,它要求被測樣品 濃度與其相應(yīng)的熒光值必須處于線性范圍內(nèi)。
 
  3.內(nèi)標(biāo)法
 
  試樣和標(biāo)樣溶液的濃度比=(試樣熒光值-試樣本底熒光值)/(試樣加標(biāo)樣的混合溶液熒光值-試樣熒光值)
 
  用內(nèi)標(biāo)法時,由于試樣和標(biāo)樣的熒光值 是在相同體系中測定的 ,因此可消除試樣中 某些雜質(zhì)熒光的干擾 。

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