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關(guān)于大鼠ELISA試劑盒HIV測定過程
1 配液：ELISA試劑盒將50ml濃縮洗刷液用蒸餾水或去離子水20倍稀釋至1000ml備用。
2 編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板設(shè)陰性對照3孔、陽性對照Ⅰ型、Ⅱ型各1孔，空白對照1孔。
3 加樣：分別在相應(yīng)孔加入待檢標(biāo)本、陰性、陽性對照100μl，用封板膜封板后置37℃溫育30min。
4 洗刷：當(dāng)心把封板膜揭去，用洗板機挑選5次程序，洗板后拍干。
5 加酶：每孔加酶結(jié)合物100μl(空白對照孔除外)，充沛混勻，用封板膜封板后置37℃溫育30min。
6 洗刷：當(dāng)心把封板膜揭去，用洗板機挑選5次程序，洗板后拍干。
7 顯色：每孔加入顯色劑A液和B液各50μl，悄悄振動混勻，封板后置37℃避光顯色15min。
8 測定：每孔加終止液50μl，悄悄振動混勻。設(shè)定酶標(biāo)儀波長為450nm(建議使用雙波長的酶標(biāo)儀比色，參閱波長630 nm)，空白調(diào)零，讀取各孔OD值。
9 判斷成果：核算臨界值(cut-off)(CO)值。 臨界值=陰性對照A均值+0.12 正常情況下，陰性對照孔的OD值≤0.10(若1孔陰性對照的OD值>0.1應(yīng)放棄，若有2孔或2孔以上陰性對照的OD值>0.1，應(yīng)重復(fù)實驗。)。樣品OD值<臨界值者為HIV抗體陰性。
正常情況下，陽性對照孔的OD值≥0.80(若1孔陽性對照的OD值<0.8應(yīng)放棄，若有2孔或2孔以上陽性對照的OD值<0.8，應(yīng)重復(fù)實驗。樣品OD值≥臨界值者為HIV抗體陽性。
ELISA試劑盒注意：關(guān)于篩查陽性標(biāo)本，應(yīng)從頭取樣雙孔復(fù)試，復(fù)試陽性者應(yīng)按照《全國*管理規(guī)范》送HIV確證實驗室進行確證實驗。 質(zhì)量操控： 每塊板設(shè)陰陽性及空白對照，并于每次實驗用克己質(zhì)控血清作質(zhì)控，將質(zhì)控血清孔OD值采用“即刻法"核算或標(biāo)在質(zhì)控圖上，如質(zhì)控有效，標(biāo)明實驗牢靠；如失控，則要查看試劑效期、貯藏溫度、試 驗溫度是否正常、操作過程是否正確，直至從頭實驗使其在控。
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2025第13屆武漢國際科學(xué)儀器與實驗室裝備展覽會
展會城市：武漢市展會時間：2025-03-20