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棗中糖類的測定|磷酸-苯肼柱后衍生法

來源: 日立分析儀器(上海)有限公司    2020年09月09日 15:35  
  入秋了,又到了吃棗的季節(jié)。棗果不僅是滋補(bǔ)佳品,也是一味傳統(tǒng)的中藥,并且棗中含有多種糖類。糖類是自然界中廣泛分布的一類重要的有機(jī)化合物,是一切生命體維持生命活動所需能量的主要來源。
 
  在高效液相色譜儀(HPLC)測試中,糖類的分子通常采用通用型檢測器檢測,如示差折光檢測器(RI)進(jìn)行檢測。但采用RI檢測器有兩個明顯的缺點(diǎn):靈敏度低、不能梯度洗脫。采用磷酸-苯肼柱后衍生法測定糖類,可以克服RI檢測器的以上兩個缺點(diǎn)。
 
  下面我們使用日立Chromaster高效液相色譜儀,利用磷酸-苯肼柱后衍生法進(jìn)行糖類的分析。色譜柱將糖類分離,再與磷酸-苯肼溶液在高溫下反應(yīng),使用有選擇性,高靈敏度的熒光檢測器進(jìn)行檢測,梯度洗脫可以多種糖成分同時分析。此方法克服了示差折光檢測器的靈敏度低和不能梯度洗脫的缺點(diǎn)。
 
  ■ 流路圖
 
  儀器配置: Chromaster 5110 泵,5210 自動進(jìn)樣器,5310 柱溫箱,5410 UV檢測器,5510反應(yīng)單元
 
  ■ 標(biāo)準(zhǔn)品測定例
 
■ 系統(tǒng)適用性(100 mg/L 糖標(biāo)準(zhǔn)混合液)
 
  分別對硅膠基質(zhì)和聚合物基質(zhì)色譜柱的系統(tǒng)適用性進(jìn)行評價,理論塔板數(shù)按蔗糖峰計算,分離度以葡萄糖和半乳糖的分離度計算,結(jié)果得到色譜柱的理論塔板數(shù)和分離度如上表所示。聚合物基質(zhì)色譜柱的測定,理論塔板數(shù)較低,但色譜柱的壽命較長;硅膠基質(zhì)色譜柱的測定,色譜峰的峰形尖銳,分離度改善很多。后續(xù)實驗均采用硅膠基質(zhì)色譜柱。
 
  ■線性
 
  以半乳糖和蔗糖為例,各種糖成分在10 ~ 500 mg/L標(biāo)準(zhǔn)混合液的濃度范圍內(nèi),R2 ≥ 0.9995,線性關(guān)系良好。
 
  ■ 重現(xiàn)性
 
■ 棗樣品的分析結(jié)果
 
  對大棗樣品進(jìn)行了糖成分的分析,結(jié)果在棗中檢測到果糖、葡萄糖和蔗糖成分,并且均得到很好的分離效果。

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