一. liu體剪切力細(xì)胞實(shí)驗(yàn)背景
液體是每個(gè)生物物種的重要組成部分。在生理狀態(tài)下,許多細(xì)胞類型被流體環(huán)境包圍。典型例子包括:血管內(nèi)皮細(xì)胞,形成血管內(nèi)層,淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞,形成淋巴管內(nèi)層,腎和肺的上皮細(xì)胞。
這種液體流動(dòng)引起剪切應(yīng)力,這是一種機(jī)械力,以多種方式影響細(xì)胞形態(tài)和行為。在許多標(biāo)準(zhǔn)體外實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞在沒有流動(dòng)的情況下培養(yǎng)。在這些靜態(tài)條件下,通常沒有考慮剪切應(yīng)力依賴性細(xì)胞變化。實(shí)際上,在流動(dòng)下的體外細(xì)胞培養(yǎng)并模擬這種機(jī)械刺激并誘導(dǎo)更加接近生理狀態(tài)的體內(nèi)生物過程行為很有意義。特別對(duì)于研究在生物流體中存在的細(xì)胞時(shí),模擬流動(dòng)狀態(tài)顯得尤其重要,如內(nèi)皮細(xì)胞或上皮細(xì)胞。
下圖實(shí)驗(yàn)顯示了靜態(tài)和流動(dòng)狀態(tài)下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的免疫熒光圖像,顯示在流體環(huán)境和靜止環(huán)境下細(xì)胞的不同狀態(tài)。 用鬼筆環(huán)肽(紅色)染色細(xì)胞骨架F-肌動(dòng)蛋白。 VE-鈣粘蛋白(綠色)標(biāo)記粘附連接點(diǎn)。 使用DAPI(藍(lán)色)染色細(xì)胞核。
左:HUVEC,靜態(tài)培養(yǎng),0 dyn / cm, 2.5天, μ-slide 35mm培養(yǎng)皿。 右:HUVEC,流體剪切力10 dyn /cm²環(huán)境,2天,μ-Slide I 0.4 Luer.
二.流動(dòng)剪切應(yīng)力對(duì)細(xì)胞的影響
剪切應(yīng)力是由液體對(duì)頂端細(xì)胞膜的摩擦引起的機(jī)械力。 在體內(nèi),幾種貼壁細(xì)胞類型暴露于生物流體系統(tǒng)中的機(jī)械剪切應(yīng)力,例如血液和淋巴管或腎單位。 這種機(jī)械刺激對(duì)細(xì)胞的生理行為和粘附特性有很大影響。 細(xì)胞通過離子通道激活,基因表達(dá)和整個(gè)細(xì)胞層的重組的變化對(duì)剪切應(yīng)力起反應(yīng)。
上圖顯示了HUVEC在流動(dòng)條件下(20 dyn /cm²)培養(yǎng) μ-SlideI 0.4 Luer 超過9天。 為了觀察細(xì)胞骨架,用腺病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞RAV巨細(xì)胞病毒-LifeAct-TagRFP 實(shí)驗(yàn)前24小時(shí)。
剪切應(yīng)力以達(dá)因/平方厘米(dyn / cm 2)測(cè)量, 生理剪切應(yīng)力值的范圍為0.5至120達(dá)因/平方厘米,取決于血管類型(例如,動(dòng)脈或靜脈),組織(例如,腦,結(jié)締組織或心臟),以及生物體的大小(例如,小鼠,大鼠或人)。
常見組織細(xì)胞的剪切力范圍:
組織類型剪切應(yīng)力(dyn /cm²)
主動(dòng)脈~ 1–22
動(dòng)脈~ 10–70
靜脈~ 1–6
毛細(xì)血管~ 3–95
三.不同類型的流動(dòng)簡(jiǎn)要介紹
在不同的生物組織中,通常具有幾種明確特征的幾種流體類型。 基本上,流動(dòng)類型可以細(xì)分為層流和湍流:
下面是我們整理的幾種常見類型流體情況及特征
流動(dòng)類型生理發(fā)生流量流動(dòng)的方向使用ibidi泵/載玻片生成
層流在許多健康的血管中常見 是
單向?qū)恿?/strong>在大多數(shù)小型健康生物血管中不變不變是
脈動(dòng)層流在大動(dòng)脈血管中由于心跳引起的波動(dòng)定期更改不變是
振蕩層流接受作為使用流動(dòng)室的湍流模擬的手段不變定期更改是
湍流罕見,在病理生理過程中更改更改沒有
1 . 層流類型
層流被定義為沒有湍流的液體運(yùn)動(dòng)。 流體以平行層流動(dòng),它們之間沒有中斷。 層流可以細(xì)分為以下幾種:
•單向?qū)恿?br />
•脈動(dòng)層流
•振蕩層流
2 .單向?qū)恿?br />
在大多數(shù)小的健康生物血管中遇到單向?qū)恿?,例如小?dòng)脈和靜脈。 在體內(nèi),某些細(xì)胞,例如內(nèi)皮細(xì)胞和腎上皮細(xì)胞,經(jīng)常暴露于流動(dòng)。
在實(shí)驗(yàn)上,通過在低壁通道中灌注介質(zhì),并通過保持流動(dòng)方向和速度隨時(shí)間恒定來實(shí)現(xiàn)單向?qū)恿鳌?br />
3 .非均勻?qū)恿?br />
單向?qū)恿骺梢砸圆痪鶆虻膱D案發(fā)生。 這里,流動(dòng)方向是恒定的,而流速在細(xì)胞層上空間變化。 在體內(nèi),在血管分支部位發(fā)生不均勻的層流。 在實(shí)驗(yàn)上,非均勻?qū)恿骷羟袘?yīng)力可以通過特殊的通道幾何形狀來實(shí)現(xiàn),其在載玻片內(nèi)的特定位置處產(chǎn)生流速變化。微型μ-Slide Y形載玻片,已被設(shè)計(jì)用于研究非均勻流動(dòng)的使用 ibidi泵系統(tǒng) 。 剪切應(yīng)力水平取決于Y-形玻片的不同區(qū)域。
4 .脈動(dòng)層流
由于心跳引起的波動(dòng),在大動(dòng)脈血管中遇到脈動(dòng)層流。 實(shí)驗(yàn)上,這種類型的流動(dòng)可以通過采用具有周期性變化的流速和恒定流動(dòng)方向的流動(dòng)來模擬。
5 .振蕩層流
振蕩層流用作模擬湍流的手段。 流動(dòng)方向以固定間隔改變。 除了閥門切換時(shí),流量也是恒定的。
6 . 湍流
湍流的特征在于流速和方向隨時(shí)間的不可預(yù)測(cè)的變化。 在體內(nèi),湍流很少見,只能在病理生理過程中發(fā)現(xiàn)。