年初《Nature》雜志展望 2018 年生物醫(yī)學(xué)技術(shù)突破，作為「technology to watch in 2018」——質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)（CyTOF），很多國內(nèi)外大咖已經(jīng)聚焦這項(xiàng)技術(shù)。質(zhì)譜流式技術(shù)（CyTOF）可以對(duì)數(shù)百萬細(xì)胞進(jìn)行超過 40 個(gè)參數(shù)的單細(xì)胞分析，讓研究更加全面、深入。

質(zhì)譜流式

與傳統(tǒng)流式技術(shù)相比，質(zhì)譜流式采用非放射性的穩(wěn)定重金屬同位素作為抗體的標(biāo)簽，達(dá)到同時(shí)測(cè)量單細(xì)胞中多個(gè)靶點(diǎn)的目標(biāo)，高純度金屬同位素確保了低的背景以及小的信號(hào)重疊。

質(zhì)譜流式原理

質(zhì)譜流式技術(shù)需要用到金屬偶聯(lián)標(biāo)記的抗體?？贵w質(zhì)量，尤其是特異性是后續(xù)實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。使用經(jīng)過嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證的抗體，能大大提高實(shí)驗(yàn)成功率。

質(zhì)譜免疫組化

基于 CyTOF 技術(shù)，質(zhì)譜流式成像技術(shù) Imaging Mass Cytometry™ 將質(zhì)譜流式（CyTOF）超高檢測(cè)通道數(shù)量的優(yōu)勢(shì)在組織成像研究中大化，其性能遠(yuǎn)遠(yuǎn)超越了傳統(tǒng)的免疫組化或者免疫熒光技術(shù)。目前通過單次掃描即可獲得組織切片樣本上 4-37 種蛋白標(biāo)記物的圖像數(shù)據(jù)，準(zhǔn)確反映了蛋白及對(duì)應(yīng)的細(xì)胞在組織微環(huán)境中的表型和相互關(guān)系等多方面綜合全面的信息，特別是針對(duì)一些珍貴的 FFPE 樣本或冰凍組織切片，可以在亞細(xì)胞水平進(jìn)行更深入的分析。

1、這么牛的技術(shù)對(duì)抗體有什么要求嗎？

一般而言，常規(guī)的一抗，儲(chǔ)存液中都包含BSA、甘油、等可能會(huì)干擾部分偶聯(lián)標(biāo)記化學(xué)反應(yīng)的成分。這些干擾成分在常規(guī)的無需對(duì)抗體進(jìn)行改造的實(shí)驗(yàn)中能提高抗體的穩(wěn)定性、降低移液損失和冰凍造成的效價(jià)降低。但是在抗體偶聯(lián)標(biāo)記類實(shí)驗(yàn)（包含金屬標(biāo)記反應(yīng)）中可能會(huì)造成標(biāo)記效率降低的問題。所以，CyTOF 需要無載體緩沖液的抗體形式，不包含 BSA、甘油、疊氮鈉等可能干擾重金屬標(biāo)記反應(yīng)的抗體緩沖液。

2、CST 是否可以提供 CyTOF 定制抗體？

CST 可以提供這種定制形式的抗體可直接儲(chǔ)存在 PBS 緩沖液中，并且可以定制成更高抗體濃度（部分可能以 >1 mg/ml 濃度提供）的產(chǎn)品，便于后續(xù)進(jìn)行偶聯(lián)標(biāo)記反應(yīng)。

3、如何提高 CST 的抗體做 CyTOF 的成功率？

雖然目前質(zhì)譜流式技術(shù)不在 CST 標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)部應(yīng)用驗(yàn)證流程中，如果您遵循以下建議，很有可能提高該實(shí)驗(yàn)的成功率。

若采用 Helios™ 平臺(tái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，可優(yōu)先考慮從 CST 的 Flow 驗(yàn)證過的抗體目錄中進(jìn)行選擇。

若采用 Imaging Mass Cytometry™ 平臺(tái)，您選擇的抗體應(yīng)與樣品制備方法相匹配。對(duì)于石蠟切片樣品，可優(yōu)先考慮從 CST 的 IHC-P 或 IF-P 應(yīng)用驗(yàn)證的抗體目錄中進(jìn)行選擇。對(duì)于冷凍組織切片，可優(yōu)先考慮從 CST 的 IF-F 或 IHC-F 應(yīng)用驗(yàn)證的抗體目錄中進(jìn)行選擇。